Actualmente, una de las causas de la declinación de anfibios en el mundo son las enfermedades infecciosas, y entre ellas, la quitridiomicosis producida por el hongo Batrachochytrium dendrobatidis es una de las más importantes. Desde su descubrimiento, el hongo ha sido registrado en múltiples lugares en todo el mundo, convirtiéndolo en un foco de estudio si se desea conservar las especies de anfibios. Con el fin de examinar la presencia del hongo en siete localidades del Valle del Cauca mediante la técnica de PCR, en este trabajo, se muestrearon siete localidades del Valle del Cauca, en las que se obtuvo muestras de epitelio de anfibios por medio de raspado con hisopos; estas muestras fueron llevadas al laboratorio, donde, por medio de la técnica PCR se detectó la presencia o ausencia de zoosporas de Batrachochytrium dendrobatidis. De las 241 muestras analizadas (40 especies), cuatro resultaron positivas para la enfermedad, todas ubicadas en la localidad de Chicoral, municipio La Cumbre, y pertenecientes a la familia Craugastoridae: Pristimantis palmeri, P. erythropleura, P. orpacobates y P. calcaratus. Se agrega al departamento una nueva localidad infectada con quitriomicosis y dos nuevas especies reportadas con la infección, por lo que es necesaria la realización de muestreos en otros lugares en la búsqueda de nuevos sitios infectados.