Las enfermedades producidas por virus como sida y leucemia son altamente prevalentes en felinos domésticos, debido a su facilidad de transmisión, presentan signos clínicos similares a otras infecciones que pueden generar dificultades en el diagnóstico, por lo tanto, se deben analizar mediante pruebas de laboratorio; los exámenes disponibles en la actualidad presentan algunas desventajas, por ello se estandarizó una PCR múltiple en tiempo real con sondas Taqman que fue diseñada para detección de infección con el virus de inmunodeficiencia felina (VIF), el virus de leucemia felina (VLFe) o mixtas. Se calculó la sensibilidad (0,53/0,26) y la especificidad (0,46/0,74) para leucemia y sida respectivamente con la metodología de Broemeling que considera que la prueba de referencia contra la cual se compara no es un referente verdadero (Gold standard), según estos resultados se concluye que es necesario aumentar el tamaño de muestra; sin embargo, la PCR múltiple es una metodología muy sensible, fue validada de forma in silico y presentó resultados congruentes al realizarla In vivo.