Los Polihidroxialcanoatos (PHAs) son biopolímeros de origen microbiano totalmente biodegradables con características físicoquímicas similares a los plásticos sintéticos convencionales, sin embargo, su producción actual es altamente costosa debido principalmente al sustrato o medio de cultivo. En esta investigación se evaluó como sustrato, una mezcla de melaza de caña y vinaza residuales de la industria licorera empleando la cepa referencia Ralstonia eutropha ATCC 17699 para la producción de PHAs. Los resultados obtenidos mostraron potencial en el uso de este medio de cultivo, alcanzando concentraciones de polímero de 3,17 g/L en medio MMS y de 2,71 g/L en el medio M/V con una relación melaza/vinaza de 25/75. El rendimiento de consumo de azucares (sacarosa, fructosa y glucosa) fue del 70,7% y una acumulación del biopolímero del 97,8% respecto a la biomasa producida. La caracterización del biopolímero presento una correlación con la muestra patrón de polihidroxibutirato - PHB del 99,25%.