Introducción: La infección invasiva del recién nacido es uno de los principales problemas infecciosos causados por Streptococcus agalactiae. Dado que su transmisión de madre a hijo se da principalmente en el comienzo del parto o durante la ruptura de membranas, la administración de profilaxis intraparto ha sido una medida eficaz para prevenir la infección neonatal por este microorganismo; no obstante, se ha encontrado alta resistencia a los antibióticos usados como tratamiento. Objetivo: Determinar el perfil de sensibilidad antimicrobiana de Streptococcus agalactiae aislados de muestras vagino-rectales en mujeres embarazadas atendidas en un hospital de tercer nivel. Materiales y Métodos: Se realizó un estudio observacional, descriptivo de corte transversal a 40 aislamientos obtenidos de la región vaginal y ano-rectal de mujeres con 35 a 37 semanas de gestación. Se realizó antibiograma por difusión en disco en medio Mueller Hinton con 5% de sangre usando sensidiscos de penicilina G, eritromicina, clindamicina, tetraciclina y levofloxacina. Resultados: El 87.5% de los aislamientos fueron sensibles a la penicilina mientras que el 12.5% se presentaron como no sensibles. La sensibilidad a clindamicina, eritromicina y levofloxacina fue del 90%, 85% y 100% respectivamente. No se encontraron aislamientos sensibles a la tetraciclina. Se observó el fenotipo iMLSB en 3 cepas (7.5%) y el fenotipo M en 2 (5%). Conclusiones: La presencia de aislamientos no sensibles a la penicilina hace necesaria su vigilancia por ser empleado empíricamente este antibiótico como tratamiento de elección en la profilaxis intraparto. Los aislamientos analizados presentaron resistencia a eritromicina, clindamicina y expresaron el fenotipo M e inducible.