El Lactobacillus casei es un microorganismo que se utiliza como probiótico ya que genera actividad antagónica contra patógenos causantes de desordenes gastrointestinales, debido a su capacidad inmunomoduladora y a cambios de pH generados por la producción de ácido láctico. Por esta razón, este trabajo se ha enfocado en evaluar la producción del microorganismo y del ácido láctico, adaptando como sustrato un subproducto de la industria láctea (lacto-suero), que es un gran contaminante al vertido a los cuerpos de agua, para esta investigación el lactosuero es desproteinizado y enriquecido con diferentes cantidades de glucosa. Se lograron estandarizar curvas de crecimiento bacteriano en lacto-suero con una producción celular de 5,9x1010 UFC/mL en 75 h, y de ácido láctico de 70,39 y 76,24 g/L en 93 h, con 0% y 5% de glucosa respectivamente. Igualmente se estandarizó un proceso de liofilización para conservar el Lactobacillus casei producido durante la investigación. Finalmente, se verificó la pureza de la cepa a través del kit API 50CH.