Introduccion: los cultivos celulares se utilizan frecuentemente en la investigacion biomedica, en el area industrial y en pruebas diagnosticas en los hospitales. La contaminacion de los cultivos celulares por microorganismos o por contaminacion cruzada entre cultivos es uno de los principales problemas en la investigacion. Objetivo: deteccion de micoplasmas en cultivos celulares provenientes de diferentes laboratorios biomedicos. Material y metodos: los cultivos celulares se evaluaron para detectar presencia de micoplasmas por medio de cultivo microbiologico y PCR. Los cultivos celulares fueron crecidos en ausencia de antibioticos durante 3-4 dias. La identificacion se presento por el cambio en el indicador de pH y ausencia de turbidez en el caldo y por la presencia en agar de las colonias caracteristicas a traves de microscopia estereoscopica. La comparacion de los resultados obtenidos entre el metodo microbiologico y PCR se realizo con la prueba de T de Student. Resultados: por el metodo microbiologico se detecto en 9/20 muestras (45%) presencia de micoplasmas en los cultivos celulares y por medio de la prueba de PCR resultaron positivas 10/20 muestras (50%) de cultivos celulares. El analisis estadistico mostro que no hay diferencia significativa (P>0.05) en la deteccion entre el metodo microbiologico y PCR. Conclusiones: es recomendable que la deteccion de micoplasmas en cultivos celulares debe reforzarse con otra tecnica para validar los resultados. Rev.cienc. biomed.2010; 1 (2): 187 - 189 PALABRAS CLAVES Cultivos celulares. Contaminacion. Micoplasmas. Deteccion. SUMMARY Introduction : cells cultures are widely used in both biomedical and biotechnological research centers and industry, as well as for diagnostic test in hospitals. Contaminations of cells cultures with microbial organisms as well as with virus or other eukaryotic cell lines are a major problem in cell culture related research. Objective : mycoplasmas detection in cells cultures came from biomedical laboratories. Material and methods: the cells cultures screened for mycoplasmas by using of microbiological culture and PCR. Cells cultures were grown in the absence of antibiotics for 3-4 days. The identified based on alterations in the pH of the broth in the absence of turbidity, production of fried egg colonies. Comparison between microbiological and PCR were made using Student T test. Results : mycoplasmas were detected by culture in 9/20 (45%) of the cell culture samples and PCR revealed the presence of target DNA in 10/20 (50%) samples. Mycoplasmas detection between the microbiological culture and PCR showing not significant differences (P>0.05). Conclusion : mycoplasmas detection in cell cultures must be strengthen with another technique to validate the results.