Introduccion. Pleurotus ostreatus es un hongo comestible y medicinal cultivable sobre residuos lignocelulosicos agroindustriales. Su concentracion de lipidos totales puede encontrarse entre 2 % y 6 %, siendo mayoritarios los acidos grasos insaturados (omega), los cuales junto a otros compuestos bioactivos, actuan en la reduccion de trigliceridos y colesterol en humanos. Objetivo. Evaluar la composicion de acidos grasos en los cuerpos fructiferos de P. ostreatus cultivado en diferentes sustratos de origen agricola. Materiales y metodos. Los residuos empleados fueron pulpa de cafe, bagazo de fique, raquis de palma de aceite y granza de avena forrajera. Se empleo micelio comercial de P. ostreatus (CP-50) y su cultivo se desarrollo bajo condiciones controladas. La extraccion de lipidos totales de las setas se hizo con el metodo de Folch y el analisis de los metil esteres de los acidos grasos se realizo mediante GC-FID. Resultados. La concentracion de lipidos totales se expreso como la media ± DS de tres repeticiones. Hubo mayor concentracion de lipidos totales (2,40 ± 0,09 %) al emplearse el sustrato con raquis de palma de aceite en 96 %. En la fraccion de acidos grasos mayoritarios de todos los tratamientos hubo presencia de acido palmitico, acido oleico y acido linoleico, encontrandose ese ultimo en valores cercanos al 70 %. Conclusion. El incremento de concentracion de lipidos totales en P. ostreatus, asi como la elevada concentracion del acido linoleico en los hongos de todos los tratamientos, se vieron influenciados por las caracteristicas del sustrato preparado con raquis de palma de aceite cuya composicion presento mayor contenido lipidico.