A neosporose tem grande importância em bovinos, e sua patogênese neste hospedeiro, em termos gerais, está esclarecida, porém, em equídeos é pobremente conhecida. Na Colômbia ainda não foram reportados anticorpos Anti-Neospora spp. em equídeos, sendo assim objetivou-se no presente estudo avaliar a ocorrência do parasito em jumentos (Equus asinus) de fazendas que apresentavam risco da doença nestes animais. Foram utilizados 56 animais no estado de Sucre (Colômbia), escolhidos aleatoriamente dentro das fazendas selecionadas. Utilizou-se um peptídeo recombinante originado de Neospora caninum (NcGRA1) para o diagnóstico por Dot-ELISA, e o soro foi diluído em 1:200. Este estudo reporta, pela primeira vez no estado de Sucre e na Colômbia, a presença de anticorpos anti-Neospora spp. na espécie Equus asinus, com uma ocorrência de 19,7% (11/56) dos animais amostrados.