Presentamos información sobre la distribución geográfica, morfología y reproducción de Vampyriscus nymphaea en Colombia, basándonos en la revisión de especímenes museológicos de colecciones colombianas. Previamente la distribución de V. nymphaea en Colombia se consideraba restringida a las tierras bajas al occidente de la cordillera Occidental en la región Pacífico; en este trabajo confirmamos la presencia de esta especie en la región Caribe y en el nororiente de la cordillera Occidental de los Andes colombianos en el Bajo Río Cauca. La morfología externa y craneana de la especie fue homogénea y el análisis de dimorfismo sexual secundario de las poblaciones de la región Pacífico no mostró diferencias significativas, sin embargo la longitud de la tibia y la profundidad de la caja craneana son proporcionalmente mayores en los machos y el ancho zigomático en las hembras. Respecto a labiología reproductiva sugerimos que las poblaciones de V. nymphaea presentan un patrón poliéstrico sin picos definidos a lo largo del año.