Objetivo. Evaluar la actividad de la enzima fosfatasa alcalina en pulpa dental humana expuesta a tres cementos endodonticos para recubrimiento pulpar directo; MTA ProRoot™, cemento Portland tipo I con oxido de bismuto al 25% y cemento Portland tipo I. Metodos. Se utilizo como grupo control positivo; cultivo de osteoblastos, y como controles negativos cultivos de fibroblastos pulpares sin exposicion y cultivos de fibroblastos pulpares expuestos a Levamisol. Se utilizo una muestra por conveniencia de 9 pozos con 5000 fibroblastos de pulpa dental humana, 3 replicas por cada condicion estudiada, para un total de 27 pozos por grupo y cada grupo fue expuesto cada cemento por 72 horas y evaluados por fluorometria Los datos fueron analizados con ANOVA y comparaciones multiples de Bonferroni (p < 0,005). Resultados. Al evaluarse la actividad fosfatasa alcalina de los tres cementos, se encontro mayor porcentaje de esta actividad en el cemento Portland (15.56 DS +/- 9.92) seguido de MTA (13.37 DS +/- 7.61) y en cemento Portland + Oxido de Bismuto al 25% (11.88 DS +/- 6.36); sin presentar diferencias estadisticamente significativas entre los tres. Al comparar la actividad de la fosfatasa alcalina se encontraron diferencias estadisticamente significativas siendo mayor la actividad reportada por los fibroblastos pulpares no expuestos (33.04 DS +/- 21.93). Conclusiones. La actividad de la fosfatasa alcalina de los fibroblastos pulpares estuvo disminuida frente a los tres cementos evaluados a las 72 hrs. comparados con la actividad de esta enzima observada en fibroblastos sin estimulo alguno.