Titulo en espanol: Deteccion molecular de potyvirus en hojas y minibulbillos de ajo, Allium sativum, asociados a un programa de produccion de semilla limpia Titulo en ingles: Molecular detection of potyvirus in leaves and small bulbs of garlic, Allium sativum , associated a clean seed production program Titulo corto: Deteccion de potyvirus en plantas de ajo Resumen: El ajo ( Allium sativum L) se reproduce vegetativamente utilizando bulbillos, condicion que favorece la propagacion de enfermedades, especialmente bacterias, hongos y virus que afectan la calidad y el rendimiento del cultivo. Por este motivo se implemento la identificacion molecular por RT-PCR de los potyvirus LYSV y OYDV en el sistema de produccion de semilla limpia de ajo en tres clones nacionales. En la fase de produccion de semilla limpia mediante micropropagacion, se estandarizo el establecimiento de meristemos de ajo. La presencia de potyvirus se analizo en 586 plantulas mediante ELISA y en 70 por RT-PCR. Para la RT-PCR se extrajo ARN a partir de microbulbillos y hojas de plantulas, obteniendose 1.7 a 226 ng/ml de ARN y se sintetizo entre 35 a 50 ng de cADN. Los resultados obtenidos mostraron que el protocolo de desinfeccion produjo una viabilidad del 73.6%. El analisis ELISA presento un saneamiento del 96.1% de las plantulas a potyvirus, mientras que con RT-PCR se identifico la presencia de LYSV en el 8.6% de las muestras evaluadas. El virus del enanismo amarrillo de la cebolla (OYDV) no fue detectado en ninguna de las muestras. Los resultados muestran que el cultivo in vitro de meristemos de ajo es una excelente alternativa para la produccion de semilla, mostrando un 92% de eficiencia. Ademas, validan el diagnostico eficiente del potyvirus LYSV en hojas y microbulbillos de ajo. Palabras clave: Allium sativum, ELISA, micropropagacion, LSYV, potyvirus, OYDV, RT-PCR. Abstract: Garlic ( Allium sativum L), reproduces vegetatively using bulbils, condition that favors the spread of diseases, especially bacteria, fungi and viruses, which affect the quality and crop yield. For this reason, the molecular identification by RT-PCR of potyvirus: LYSV and OYDV in the production system of clean seed garlic of three national clones were implemented. In the production phase of clean seed was establishing garlic meristems micropropagation. Potyvirus presence in 586 seedlings was analyzed by ELISA and for RT-PCR in 70. RNA was extracted from leaves and small bulbs, yielding 1.7 to 226 ng/µl, and with this RNA, between 35 to 50 ng of cDNA. The results showed that the disinfection protocol produced a 73.6% viability of plants. ELISA analysis showed 96% sanitation of seedling to potyvirus, whereas, Leek Yellow Strip Virus, LYSV was identified in 8.6% of samples used RT-PCR methodology. Onion yellow dwarf virus (OYDV) was not detected in any sample. The results show that the in vitro culture of meristem of garlic, is an excellent alternative for seed production, showing a 92% efficiency. Moreover, efficient diagnostics of LYSV potyvirus was validated in leaves and small bulbs of garlic. Key words : Allium sativum , ELISA, micropropagation, LSYV, potyvirus, OYDV, RT-PCR. Recibido: octubre 18 de 2013 Aprobado: octubre 1 de 2014