Una limitante en los sistemas de producción de leche es la mastitis bovina. El objetivo fue determinar la producción de enterotoxinas A, B, C y D en cepas de S. aureus aisladas de casos de mastitis bovina en sistemas doble propósito en Córdoba (Colombia). Se obtuvieron 25 cepas de una bacterioteca existente. La identificación se realizó por crecimiento en diferentes medios de cultivo mediante pruebas bioquímicas. Se confirmó la identificación como S. aureus utilizando PCR para la detección del gen nuc. Se evaluó la susceptibilidad antibacteriana y la producción de enterotoxinas mediante un sistema de aglutinación pasiva reversa en latex. Las 25 cepas fueron clasificadas como S. aureus, ya que mostraron resultados positivos en las pruebas implementadas. Todas fueron sensibles a MRSA y en un S. aureus se evidenció la producción de enterotoxina C.