Introduccion: es necesario identificar de forma simple y rapida el bacilo Mycobacterium tuberculosis (MTB) para la instauracion temprana de tratamiento efectivo y de medidas de control que prevengan la transmision de la enfermedad. Objetivos: evaluar la utilidad de la prueba Genotype MTBDRplus para la identificacion de M. tuberculosis en muestras respiratorias de pacientes atendidos en el Hospital Universitario San Vicente de Paul Fundacion entre junio y agosto de 2010. Materiales y metodos: las muestras respiratorias fueron colectadas de 100 pacientes atendidos en el Hospital, a las cuales se les realizo baciloscopia, cultivo en medio Ogawa Kudoh y PCR por la prueba comercial Genotype MTBDRplus. La sensibilidad y especificidad de la PCR fue determinada tomando como referencia el cultivo en Ogawa Kudoh. Resultados: la sensibilidad, especificidad, valor predictivo positivo y valor predictivo negativo fueron 86,7 %, 93,7 %, 72,2 % y 97,4 % respectivamente. La sensibilidad en muestras con baciloscopia positiva fue 100 % y de 60 % en muestras con baciloscopia negativa. La mediana del tiempo para el reporte por PCR fue 14 dias, comparado con los 60 dias requeridos por el cultivo (p=0,000). Conclusiones: La prueba de PCR Genotype MTBDRplus es una buena opcion para la deteccion rapida de M. tuberculosis en muestras respiratorias con baciloscopia positiva.