Titulo en espanol: Identificacion, clonacion y actividad lactonasa de la proteina recombinante de N -acil homoserina lactonasa (AiiA) de Bacillus thuringiensis cepa 147-115-16 Short title: N-acyl homoserine lactonase (AiiA) from Bacillus thuringiensis Abstract: The quorum-quenching N -acyl homoserine lactonases are a family of bacterial metalloenzymes that participate in degradation of N -acyl homoserine lactones (AHLs), disrupting the quorum sensing system of gram negative bacterial species. From a collection of Bacillus thuringiensis strains isolated in Colombia from plants and exhibiting toxic activity against lepidopteran insects, 310 bacterial isolates were tested to determine lactonase activity by using biosensor systems in presence of synthetic N -hexanoyl-L-homoserine lactone (C6-HSL) and N -octanoyl-L-homoserine lactone (C8-HSL). From them, 251 strains showed degrading activity to both C6-HSL and C8-HSL, 57% exhibited degrading activity to C6-HSL and 43% to C8-HSL. One B. thuringiensis strain, denoted as 147-115-16, that exhibit high degrading activity to C6-HSL and C8-HSL, was able to attenuate soft rot symptoms in infected potato slices with Pectobacterium carotovorum . This strain contains an homologous of the aiiA gene that was cloned, sequenced and expressed in Esherichia coli DE3. The recombinant protein AiiA 147-11516 displays activity to C6-HSL, C8-HSL, N -(β-ketocaproyl) (3-O-C6-HSL) and N -3-oxo-dodecanoyl (3-O-C12-HSL). The recombinant strain in the presence of P. caratovorum cultures was able to attenuate the infection, suggesting that it interferes either with the accumulation or with the response to the AHLs signals. Acording to this data and based on previous report from recombinant AiiA 147-11516 , this enzyme exhibits activity to a wide range of catalytic substrates suggesting its industrial application in the disease control programs through plants transformation. Key words: lactones, Quorum sensing, Quorum quenching, Lactonases, Pectobacterium caratovorum Resumen: Las N -acil homoserina lactonasas son una familia de metaloenzimas bacterianas que participan en la degradacion de N -acil homoserina lactonas (AHLs) interrumpiendo el sistema de deteccion de quorum sensing de bacterias Gram negativas. A partir de una coleccion de cepas de Bacillus thuringiensis aisladas del filoplano de plantas colombianas que presentaron actividad toxina contra insectos lepidopteros, 310 fueron probadas para determinar actividad lactonasa mediante el uso de sistemas de biosensores en presencia de N -hexanoilo-L-homoserina lactona (C6-HSL) y la N -octanoilo-L-homoserina lactona (C8-HSL) sinteticas. De estas cepas, el 251 mostraron actividad para ambas lactonas y de estas, el 57% mostro actividad a C6-HSL y el 43% a C8-HSL. Una cepa de B. thuringiensis- denominada 147-115-16- que mostro alta actividad para C6-HSL y C8-HSL, fue capaz de atenuar los sintomas de la pudricion blanda en rodajas de papa infectadas con Pectobacterium carotovorum . Esta cepa contiene un gen homologo a aiiA, el cual este fue clonado, secuenciado y expresado en Escherichia coli DE3. La proteina recombinante AiiA 147-11516 exhibe actividad para C6-HSL y C8-HSL, asi como para N -(β-cetocaproil) (3-O-C6-HSL) y N -3-oxo-dodecanoil (3-O-C12-HSL). La cepa recombinante en presencia de P. caratovorum fue capaz de atenuar la infeccion, sugiriendo que interfiere con la acumulacion o respuesta de las senales AHLs. Segun estos datos y basados en el reporte previo sobre la actividad hidrolitica de la proteina recombinante AiiA 147-11516 , esta enzima posee un actividad contra un amplio numero de sustratos lo cual sugiere su aplicacion en la industria en el control de enfermedades, mediante la transformacion de plantas. Palabras clave: Lactones, Quorum sensing, Quorum quenching, Lactonases, Pectobacterium caratovorum .